La matrina suprime la fibrosis inducida por lipopolisacárido en células mesoteliales peritoneales humanas mediante la inhibición de la transición epitelial-mesenquimal
La enfermedad renal crónica (ERC) representa un problema significativo de salud pública a nivel mundial, siendo la diálisis peritoneal (DP) un método principal de terapia de reemplazo renal para pacientes con enfermedad renal en etapa terminal (ERET). Sin embargo, una de las principales complicaciones de la DP es la peritonitis, especialmente causada por bacterias Gram-negativas como Escherichia coli (E. coli). La peritonitis desencadena inflamación crónica, lo que puede inducir angiogénesis, cambios en el fenotipo de las células mesoteliales peritoneales y la deposición de matriz extracelular, culminando en fibrosis peritoneal. Esta fibrosis es una razón principal por la cual los pacientes con ERET deben suspender la DP. Por ello, comprender los mecanismos subyacentes e identificar agentes terapéuticos potenciales es crucial.
El lipopolisacárido (LPS), componente principal de la pared celular de E. coli, induce la transición epitelial-mesenquimal (TEM) en células mesoteliales peritoneales. La TEM implica la pérdida de adhesión y conexiones intercelulares en células epiteliales, transformándolas en células mesenquimales. Este proceso se caracteriza por la disminución de marcadores epiteliales (p. ej., E-cadherina) y el aumento de marcadores mesenquimales (p. ej., actina alfa de músculo liso, a-SMA). La TEM en células mesoteliales inicia la fibrosis peritoneal y, al ser reversible, constituye un objetivo terapéutico prometedor.
La matrina, un alcaloide derivado de plantas del género Sophora, posee propiedades antifibróticas, antibacterianas y antiinflamatorias. Estudios previos demuestran que inhibe la formación de biopelículas por E. coli y suprime la TEM en diversos tipos celulares. No obstante, su papel en la TEM inducida por LPS en células mesoteliales peritoneales humanas (HPMCs) bajo inflamación crónica no se ha explorado.
Este estudio evaluó si la matrina inhibe la TEM inducida por LPS en HPMCs y exploró sus mecanismos subyacentes. Se cultivaron HPMCs con LPS para simular un entorno inflamatorio y se analizó el efecto de la matrina sobre marcadores de TEM y microARNs.
Métodos
Mediante el ensayo MTT, se determinaron concentraciones no citotóxicas de LPS (0,5–20,0 mg/mL) y matrina (0,1–2,0 g/L) tras 72 horas. Se seleccionaron 10 mg/mL de LPS y 0,2, 0,4 y 0,6 g/L de matrina para experimentos posteriores.
En el ensayo de cicatrización, HPMCs en monocapa al 90% de confluencia fueron raspadas y tratadas con LPS solo o combinado con matrina (0,4 g/L). La migración celular se midió a 0, 8, 16 y 24 horas. LPS aumentó la migración, efecto revertido por la matrina.
Mediante RT-PCR y Western blot, se evaluaron los niveles de E-cadherina y a-SMA en HPMCs tratadas con LPS y matrina durante 24 horas. LPS redujo la expresión de E-cadherina y aumentó a-SMA a nivel de ARNm y proteína, mientras que la matrina revirtió estos cambios de manera dependiente de la dosis.
Además, se analizaron los microARNs miR-29b y miR-129-5p, relacionados con fibrosis. LPS disminuyó sus niveles, pero la matrina restauró su expresión de forma dosis-dependiente.
Discusión
La matrina inhibió eficazmente la TEM inducida por LPS en HPMCs, modulando marcadores de TEM y microARNs. El ensayo de cicatrización confirmó que reduce la migración celular promovida por LPS. Los análisis moleculares demostraron que la matrina aumenta E-cadherina y disminuye a-SMA, revirtiendo la TEM.
Los microARNs miR-29b (regulador negativo de la vía TGF-β/Smad) y miR-129-5p (inhibidor de SIP1 y SOX4) desempeñan roles clave en la supresión de la fibrosis. La capacidad de la matrina para aumentar sus niveles sugiere un mecanismo epigenético en su acción antifibrótica.
Estos hallazgos respaldan el potencial terapéutico de la matrina en la prevención y tratamiento de la fibrosis peritoneal asociada a DP. No obstante, se requieren estudios en modelos animales y ensayos clínicos para validar su seguridad y eficacia.
Conclusión
La matrina inhibe la TEM inducida por LPS en HPMCs mediante la regulación de marcadores epiteliales/mesenquimales y microARNs. Su capacidad para modular miR-29b y miR-129-5p subraya su relevancia como candidato terapéutico en la fibrosis peritoneal. Futuras investigaciones deberán explorar su aplicabilidad clínica en pacientes bajo DP.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000000127