Examen histológico del epitelio corneal tras iontoforesis con diferentes soluciones de riboflavina
El crosslinking corneal (CXL) con riboflavina se ha consolidado como una terapia innovadora para controlar la progresión del queratocono, una condición caracterizada por el adelgazamiento y abombamiento de la córnea. La riboflavina, un fotosensibilizador, desempeña un papel crucial al absorber radiación ultravioleta (UV) y proteger las estructuras intraoculares. Para que el CXL sea efectivo, es esencial mantener una concentración adecuada de riboflavina en el estroma corneal durante el tratamiento. Sin embargo, debido a su naturaleza hidrosoluble, la riboflavina enfrenta dificultades para penetrar la barrera epitelial corneal. Tradicionalmente, esta barrera se superaba mediante desepitelización, un método asociado con dolor, recuperación prolongada y riesgo de infección. Por ello, el CXL transepitelial, que preserva el epitelio, ha ganado relevancia. La iontoforesis, técnica que utiliza corriente eléctrica para mejorar la penetración de fármacos, se ha explorado como alternativa. Este estudio comparó los efectos de permeabilidad de la riboflavina en distintos solventes mediante iontoforesis y analizó cambios histológicos en el epitelio corneal para identificar el solvente óptimo y sus mecanismos subyacentes.
Métodos
Se utilizaron 32 conejos blancos de Nueva Zelanda sanos (2,0–2,5 kg), empleando solo el ojo derecho. Los animales se dividieron aleatoriamente en ocho grupos (n = 4 por grupo). Tres subgrupos de prueba recibieron iontoforesis con riboflavina al 0,1% en solución salina equilibrada (NaCl, KCl, CaCl₂, MgCl₂), solución salina normal o agua destilada durante 5 minutos. Tres grupos adicionales recibieron instilación de las mismas soluciones sin iontoforesis. Un grupo de desepitelización recibió riboflavina al 0,1% en dextrán tras remover el epitelio corneal. Un grupo control no recibió tratamiento. Se evaluó la coloración amarilla del estroma y humor acuoso con lámpara de hendidura. Se recolectaron muestras corneales para análisis histológico con microscopía óptica y electrónica.
Procedimiento de iontoforesis
Los conejos fueron anestesiados con sumianxina y ketamina intramuscular. Se colocó un electrodo cutáneo en la pata derecha y un eyecup sobre la córnea, conectado al electrodo de iontoforesis. Se aplicó una corriente de 1 mA durante 5 minutos. En los grupos de instilación, el eyecup se mantuvo sin corriente. En el grupo desepitelizado, se removió el epitelio central (8,5 mm) y se instiló dextrán cada 3 minutos durante 30 minutos.
Resultados
Observación clínica:
- Iontoforesis: En los subgrupos con solución salina equilibrada y normal, el epitelio se mantuvo liso y el estroma mostró coloración amarilla tenue sin edema. En el subgrupo con agua destilada, se observó edema epitelial leve y estroma amarillo intenso.
- Instilación simple: Estroma ligeramente amarillo sin edema.
- Desepitelización: Estroma marcadamente amarillo sin edema.
Histología:
- Microscopía óptica: Ausencia de epitelio en el grupo desepitelizado; estructura epitelial normal en otros grupos.
- Microscopía electrónica:
- Soluciones salinas: Espacios intercelulares levemente dilatados, con reducción de uniones estrechas y desmosomas.
- Agua destilada: Edema celular, espacios intercelulares reducidos y uniones poco definidas.
- Instilación simple: Sin cambios significativos en espacios intercelulares.
Discusión
La iontoforesis con agua destilada demostró mayor eficacia, atribuible a su baja concentración de iones parásitos, que reduce la resistencia al transporte de riboflavina en el campo eléctrico. La baja presión osmótica del agua destilada indujo edema epitelial, alterando la barrera celular. Dado que la riboflavina sigue principalmente una vía intercelular, la disminución de uniones estrechas y desmosomas facilitó su penetración. En el grupo con agua destilada, el edema celular podría haber incrementado la permeabilidad de la membrana, potenciando también la vía intracelular.
Conclusión
La iontoforesis con agua destilada optimiza la permeabilidad transepitelial de la riboflavina, ofreciendo una alternativa prometedora a la desepitelización. Sin embargo, se requieren estudios adicionales para elucidar los mecanismos moleculares de transporte de riboflavina a través del epitelio corneal.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000001579