Reutilización de Fármacos Clínicamente Aprobados para el Tratamiento de la Enfermedad por Coronavirus 2019 en un Modelo de Coronavirus Relacionado con el 2019-nCoV
El brote global de la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19), causada por el nuevo coronavirus 2019 (2019-nCoV), ha representado un desafío sin precedentes para la salud pública mundial. A principios de 2020, el número de casos confirmados y muertes continuó aumentando, especialmente en China continental, lo que subrayó la necesidad urgente de tratamientos y medidas preventivas efectivas. Este estudio abordó esta problemática mediante la reutilización de fármacos clínicamente aprobados para el tratamiento de COVID-19, utilizando un modelo de coronavirus relacionado con el 2019-nCoV.
El principal obstáculo en el desarrollo de tratamientos para infecciones por 2019-nCoV radica en la necesidad de instalaciones de alta bioseguridad para trabajar con virus vivos. Esta limitación dificulta los esfuerzos de cribado de fármacos, especialmente para instituciones sin acceso a dichas instalaciones o muestras virales. Para superar este desafío, se estableció un modelo de coronavirus de pangolín relacionado con el 2019-nCoV, denominado GX_P2V/pangolín/2017/Guangxi, como sistema alternativo para investigación y cribado.
El modelo GX_P2V comparte similitudes significativas con el 2019-nCoV, particularmente en la proteína de la espícula (spike), que presenta un 92,2% de identidad en aminoácidos con la del aislado Wuhan-hu-1. Ambos virus utilizan la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2) como receptor celular para la infección, un mecanismo confirmado mediante silenciamiento de la expresión de ACE2 con ARN de interferencia (siRNA). Al reducir la expresión de ACE2 en células Vero E6, se observó una disminución significativa en los niveles de ARNm de ACE2 y en la producción de ARN viral.
Se realizó un cribado farmacológico con dos bibliotecas que contenían 2406 fármacos aprobados y compuestos antivirales. Cada fármaco se evaluó a 10 μmol/L en células Vero E6 infectadas con GX_P2V, midiendo la inhibición de los efectos citopáticos (CPE) a las 72 horas posinfección (p.i.). Tres fármacos mostraron actividad antiviral potente: cefarantina (CEP), selamectina y mefloquina hidrocloruro.
La CEP destacó por su actividad antiviral, con una concentración efectiva media (EC50) de 0,98 μmol/L y un índice de selectividad de 39,91. El tratamiento con 10 μmol/L de CEP redujo la producción de ARN viral en 15.393 veces a las 72 h p.i., y los ensayos de placa no detectaron virus viables a las 48 h p.i. Experimentos de tiempo de adición revelaron que la CEP actúa tanto en la entrada viral como en etapas posteriores. En la fase de entrada, la CEP redujo el ARN viral 2,17 veces, mientras que en la fase posentrada la reducción fue de 1618 veces.
La selamectina, un parasiticida veterinario, y la mefloquina, un antimalárico con actividad previa contra MERS-CoV y SARS-CoV, también mostraron eficacia, aunque sus mecanismos requieren mayor estudio.
El modelo GX_P2V ofrece ventajas clave: su relación genética con el 2019-nCoV, el uso compartido de ACE2 como receptor y su manipulación en bioseguridad nivel 2. Estos factores facilitan la investigación en instituciones sin infraestructura de alta contención.
La identificación de la CEP como inhibidor potente es relevante debido a su perfil de seguridad clínica establecido y sus propiedades antiinflamatorias, que podrían mitigar la tormenta de citocinas en COVID-19 grave. Además, este estudio resalta la importancia de la vigilancia de coronavirus en fauna silvestre, ya que GX_P2V fue aislado de un pangolín incautado en 2017, años antes de la pandemia.
En conclusión, este trabajo proporciona un modelo valioso para estudiar el 2019-nCoV e identifica tres fármacos reutilizables con actividad antiviral prometedora. La CEP, en particular, merece investigación clínica acelerada como candidato terapéutico para COVID-19. Estos hallazgos subrayan el potencial de la reutilización de fármacos y la vigilancia viral en la preparación para pandemias.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000000797