Presencia de anticuerpos contra la proteína 4 relacionada con el receptor de lipoproteínas de baja densidad y alteración de la unión neuromuscular en una cohorte china de esclerosis lateral amiotrófica
La esclerosis lateral amiotrófica (ELA) es un trastorno neurodegenerativo devastador caracterizado por la pérdida progresiva de las neuronas motoras superiores e inferiores. A pesar de investigaciones extensas, la patogenia de la ELA sigue sin esclarecerse y no existe un tratamiento efectivo disponible. Esta falta de comprensión subraya la necesidad urgente de biomarcadores potenciales que ayuden a clasificar la enfermedad e identificar nuevas dianas terapéuticas. Un área prometedora de investigación implica el estudio de autoanticuerpos, particularmente aquellos dirigidos contra la proteína 4 relacionada con el receptor de lipoproteínas de baja densidad (LRP4). Estudios previos han demostrado que los anticuerpos anti-LRP4 están presentes en un subgrupo de pacientes con ELA, sugiriendo un posible papel en la fisiopatología de la enfermedad. Este estudio busca explorar la presencia de anticuerpos anti-LRP4 en una cohorte china de pacientes con ELA e investigar su correlación con la disfunción de la unión neuromuscular (UNM).
El estudio se realizó en el Hospital Xuanwu de la Universidad Médica de Capital, Beijing, China, y fue aprobado por el comité de ética institucional. Todos los participantes firmaron un consentimiento informado. La cohorte incluyó a 56 pacientes con ELA que cumplían los criterios de El-Escorial para ELA posible, probable o definitiva. Estos pacientes fueron evaluados mediante la escala funcional revisada para ELA (ALSFRS-r) y la tasa de progresión de la enfermedad, calculada como (48 – ALSFRS-r)/duración (meses). Se incluyó un grupo control con 65 pacientes con miastenia gravis (MG), 60 pacientes con otras enfermedades neuroinmunes y 63 voluntarios sanos.
Los anticuerpos anti-LRP4 se detectaron mediante un ensayo basado en células. Brevemente, se transfectaron células HEK-293T con CMV6-LRP4-tGFP humano o pEGFP como control, utilizando Lipofectamina 2000. Las células se cultivaron durante 48 horas a 37°C en CO₂ al 5%, se fijaron con metanol frío y se bloquearon con suero de cabra al 5% durante 2 horas a temperatura ambiente. Posteriormente, se incubaron durante la noche a 4°C con sueros de pacientes en diluciones 1:100 o 1:200, seguido de incubación con un anticuerpo anti-inmunoglobulina G (IgG) humana conjugado con Alexa Fluor 568 durante 1.5 horas. Los núcleos se contrastaron con DAPI durante 10 minutos. Las imágenes se adquirieron mediante microscopía confocal y se clasificaron como positivas o negativas según la intensidad de la señal y la co-localización, evaluadas por dos observadores independientes enmascarados.
Los estudios de estimulación nerviosa repetitiva (ENR) se realizaron para evaluar defectos en la UNM. Los potenciales de acción muscular compuestos (CMAP) se registraron en los músculos abductor del meñique, trapecio y orbicular de los párpados, estimulando los nervios cubital, accesorio y facial a frecuencias de 3 o 5 Hz. Una respuesta decremental definitiva se definió como una reducción ≥10% en la amplitud del CMAP. Todos los pacientes con ELA fueron examinados por el mismo técnico, enmascarado al estado de anticuerpos.
Los resultados mostraron que tres de 56 (5,4%) pacientes con ELA presentaron anticuerpos anti-LRP4, con títulos de 1:800, 1:800 y 1:1600. En un paciente reevaluado a los seis meses, los anticuerpos aumentaron un 25% conforme su condición empeoraba. En los controles, solo un paciente con MG resultó positivo (título 1:800). No se detectaron anticuerpos en otros grupos.
Notablemente, los tres pacientes positivos para anti-LRP4 mostraron alteración en la transmisión neuromuscular mediante ENR. Entre los pacientes seronegativos, 27/53 (50,9%) también exhibieron decrementos, algunos superiores al 35%, sugiriendo que los anticuerpos anti-LRP4 no son el único factor causante de la disfunción de la UNM en ELA.
La presencia de anti-LRP4 en ELA se ha reportado previamente en cohortes griegas, italianas y estadounidenses con prevalencias del 23% y 10%. La menor prevalencia en esta cohorte china podría reflejar diferencias étnicas o variaciones en datos clínicos, como la duración media de la enfermedad (16 meses vs. 36 meses en otros estudios).
LRP4, una proteína post-sináptica clave en la formación de la UNM, es esencial para la agrupación de receptores de acetilcolina. Estudios en animales indican que los anticuerpos anti-LRP4 inducen anomalías estructurales y funcionales en la UNM. Estos hallazgos respaldan su posible contribución a la disfunción de la UNM en ELA, aunque otros mecanismos coexisten.
En conclusión, este estudio identifica anticuerpos anti-LRP4 en un subgrupo de pacientes chinos con ELA y sugiere su participación en la alteración de la UNM. La menor prevalencia observada podría reflejar factores étnicos o clínicos. Se requieren más investigaciones para elucidar los mecanismos precisos y explorar su utilidad como biomarcadores o dianas terapéuticas.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000000284