Las células alveolares positivas para la región determinante del sexo Y-box 2 responden a la lesión pulmonar inducida por bleomicina
El epitelio alveolar pulmonar actúa como una barrera crítica, desempeñando un papel fundamental en el intercambio gaseoso y la defensa del huésped. Este epitelio está compuesto principalmente por células alveolares tipo I (AT1) y tipo II (AT2), interconectadas para mantener la integridad alveolar. Tras una lesión, diversas células madre y progenitoras participan en la reparación del epitelio alveolar. Por ejemplo, las células madre bronquioloalveolares (BASCs) pueden diferenciarse en células alveolares y de las vías respiratorias. Además, un subconjunto de células alveolares que expresan el receptor de laminina α6β4 (pero no la proteína C surfactante, SPC) regenera células AT2 tras lesión por bleomicina. Células basales raras positivas para queratina 5 también contribuyen a linajes epiteliales alveolares tras infección por influenza.
El factor de transcripción Sox2, asociado con la autorrenovación y pluripotencia en células madre embrionarias, tiene roles poco explorados en la reparación alveolar. Este estudio investigó la participación de células alveolares positivas para Sox2 en la regeneración epitelial postlesión.
Se aislaron células pulmonares de ratones transgénicos SFTPC-GFP mediante digestión con elastasa y clasificación por citometría de flujo (FACS). Se utilizaron anticuerpos primarios contra CD31-biotina, CD34-biotina, CD45-biotina, CD24-ficoeritrina (PE), EpCAM-PE-Cy7 y Sca-1-APC, junto con 7-aminoactinomicina D para excluir células muertas. La expresión génica se cuantificó mediante PCR en tiempo real con cebadores para β-actina y Sox2, normalizando los valores ΔCt respecto a β-actina.
En ratones reporteros Sox2-GFP, se empleó inmunofluorescencia con anticuerpos anti-GFP, Sox2 y pro-SPC, visualizados mediante microscopía confocal. Para inducir lesión, se administró bleomicina intratraqueal (2.5 U/kg), analizándose tejidos en días posteriores. Los protocolos fueron aprobados por el Comité de Ética Animal del Hospital Haihe.
El análisis por FACS identificó poblaciones SPChi (AT2) y SPClow (células alveolares con baja expresión de SPC). La expresión de Sox2 en SPClow fue menor que en células Club pero mayor que en AT2 (p <0.05). La tinción confirmó la localización alveolar de Sox2+SPClow, cercanas a la unión bronquioloalveolar (BADJ). Tras bleomicina, la proporción de Sox2+SPClow aumentó significativamente en días 14 y 21, sugiriendo participación activa en la reparación.
Estas células Sox2+SPClow representan una población distinta de otras progenitoras epiteliales conocidas. Aunque Sox2 se expresa en epitelio traqueal y vías respiratorias, su regulación en células alveolares requiere mayor estudio. Los mecanismos moleculares subyacentes a su función regenerativa permanecen indeterminados.
En conclusión, este trabajo identifica una subpoblación alveolar Sox2+SPClow que responde dinámicamente a la lesión por bleomicina, destacando su potencial papel en la homeostasis epitelial. Futuras investigaciones deberán elucidar su contribución exacta a la regeneración alveolar.
Financiamiento: Fondos de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China, la Fundación de Ciencias Naturales de Tianjin y el Fondo de Ciencia y Tecnología del Hospital Haihe.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000001086