La regulación a la baja de miR-155 inhibe la respuesta inflamatoria en células endoteliales microvasculares pulmonares humanas infectadas con el virus de la influenza A mediante la orientación al receptor 1 de esfingosina-1-fosfato
El virus de la influenza A es un patógeno respiratorio altamente contagioso que representa una amenaza significativa para la salud humana. Aunque las infecciones leves suelen limitarse al tracto respiratorio superior, los casos graves pueden progresar al síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA), con alta mortalidad. Los mecanismos moleculares subyacentes a las complicaciones graves de la infección por influenza A no se comprenden completamente, pero evidencia reciente sugiere que la producción aberrante de citocinas proinflamatorias, denominada «tormenta de citocinas», desempeña un papel clave. La modulación de la respuesta inflamatoria inducida por el virus podría representar una estrategia terapéutica válida para mitigar los desenlaces graves.
Las células endoteliales son centrales en la tormenta de citocinas durante la infección por influenza A. Estas células, que recubren los vasos sanguíneos, se activan en infecciones graves, liberando citocinas y quimiocinas que reclutan leucocitos y alteran la barrera epitelial-endotelial alveolar, culminando en SDRA. La microARN-155 (miR-155) es un regulador crítico de la inflamación, y su rol en la respuesta a la influenza A ha sido objeto de estudio reciente. Esta investigación explora el mecanismo de miR-155 en la producción de citocinas en células endoteliales infectadas, enfocándose en su interacción con el receptor 1 de esfingosina-1-fosfato (S1PR1).
El estudio empleó células endoteliales microvasculares pulmonares humanas (HPMEC) infectadas con la cepa H1N1 de influenza A. La infección se confirmó mediante inmunofluorescencia, detectando la nucleoproteína viral (NP) a las 8 horas postinfección (p.i.). Los niveles de citocinas proinflamatorias y miR-155 se cuantificaron mediante PCR en tiempo real. La interacción miR-155/S1PR1 se analizó con un ensayo de reportero de luciferasa dual, y los cambios proteicos mediante Western blot.
Los resultados mostraron que la expresión de miR-155 aumentó significativamente en HPMEC infectadas con H1N1. A las 24 h p.i., el cambio en la expresión de miR-155 fue de 3,875 ± 0,062 versus 1,043 ± 0,013 a 0 h (P = 0,001). La sobreexpresión de miR-155 potenció la producción de citocinas como IL-1β, IL-6, IL-8, CCL2, CCL5, TNF-α e IFN-β. Por el contrario, la inhibición de miR-155 redujo estos niveles. Por ejemplo, la expresión de ARNm de IL-1β aumentó en células tratadas con miméticos de miR-155 (P = 0,001) y disminuyó con inhibidores (P = 0,005).
El estudio identificó a S1PR1 como diana directa de miR-155. S1PR1, un receptor acoplado a proteína G que regula respuestas inmunes y activación endotelial, mostró interacción funcional con miR-155 mediante el ensayo de luciferasa: miR-155 redujo la actividad del reportero con la región 3′-UTR silvestre de S1PR1, pero no con la mutada. La sobreexpresión de miR-155 disminuyó los niveles de S1PR1, mientras que su inhibición los aumentó. En HPMEC infectadas, la regulación a la baja de S1PR1 redujo el efecto inhibitorio del bloqueo de miR-155 sobre la producción de citocinas y la activación de NF-κB.
NF-κB, un factor de transcripción crítico en la respuesta proinflamatoria, mostró mayor fosforilación de su subunidad p65 (fosfo-p65) tras la sobreexpresión de miR-155, efecto revertido con su inhibición. La reducción de S1PR1 mediante siRNA atenuó el impacto del bloqueo de miR-155 sobre NF-κB, sugiriendo que la función de miR-155 en HPMEC infectadas está mediada por S1PR1.
Estos hallazgos destacan a miR-155 como regulador positivo de la inflamación en células endoteliales infectadas. Su upregulación suprime S1PR1, activando la señalización de NF-κB y aumentando la producción de citocinas. La inhibición de miR-155 atenúa esta respuesta al promover S1PR1, lo que sugiere que el eje miR-155/S1PR1 podría ser un blanco terapéutico para complicaciones graves como el SDRA.
Además, se subraya el papel de la activación endotelial en la patogénesis del SDRA por influenza. La modulación de miR-155 y su interacción con S1PR1 y NF-κB podría ofrecer estrategias para limitar la tormenta de citocinas y preservar la barrera endotelial.
En conclusión, este estudio demuestra que miR-155 promueve la inflamación en células endoteliales infectadas con influenza A mediante la regulación de S1PR1 y la activación de NF-κB. Su inhibición reduce la producción de citocinas, proponiendo al eje miR-155/S1PR1 como un objetivo prometedor para intervenciones terapéuticas en infecciones graves por influenza A. Futuras investigaciones deberán explorar el potencial de la inhibición de miR-155 in vivo y el desarrollo de terapias dirigidas contra el SDRA asociado a influenza.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000001036