La deficiencia del canal de dos poros TPCN2 contribuye al lupus eritematoso sistémico mediante la regulación de la apoptosis y el ciclo celular
El lupus eritematoso sistémico (LES) es una enfermedad autoinmunitaria compleja caracterizada por la producción de autoanticuerpos y complejos inmunitarios que afectan órganos como riñones, articulaciones y sangre. Aunque predomina en mujeres adultas (3-6 veces más que en hombres), su etiología sigue sin esclarecerse a pesar de estudios genómicos amplios. Este estudio explora el papel del canal de dos poros TPCN2 en la patogénesis del LES.
TPCN2, miembro de la familia de canales de dos poros (TPCs), se localiza en almacenes de Ca²⁺ endolisosomales y se asocia con enfermedades como Parkinson, cáncer e infecciones virales. Estudios previos identificaron a TPCN2 como gen de susceptibilidad para LES, pero su función patogénica sigue siendo ambigua.
Mediante qRT-PCR, se observó una disminución significativa de la expresión de TPCN2 en células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de pacientes con LES versus controles sanos. Para evaluar su función, se realizó silenciamiento génico con lentivirus en líneas celulares Jurkat (linfocitos T) y THP-1 (monocitos). El knockdown se confirmó por qRT-PCR y Western blot.
El silenciamiento de TPCN2 inhibió la proliferación celular (ensayo CCK-8) e indujo apoptosis y arresto en fase G2/M en ambas líneas. En Jurkat, la proporción de células apoptóticas (Annexina V⁺) fue tres veces mayor en los grupos knockdown versus control. En THP-1, el silenciamiento con shTPCN2#1 y shTPCN2#2 indujo un 13,86% y 20,26% de apoptosis, respectivamente.
El análisis de RNA-seq en células Jurkat deficientes en TPCN2 reveló 906 genes sobreexpresados y 312 reprimidos en sh#1, mientras que sh#2 mostró 362 genes upregulados y 598 downregulados. La clasificación GO y KEGG indicó enriquecimiento en procesos como regulación del ciclo celular, respuesta inflamatoria y vías de señalización FoxO, receptor de células T y hormonas tiroideas. El GSEA asoció la deficiencia de TPCN2 con el punto de control G2/M, respuesta a IFN-γ, sistema de complemento y rutas PI3K-AKT-mTOR e IL-6-JAK-STAT.
La validación de genes clave mostró upregulación de NCOA3, S100A8, AHNAK, GRB10, PMEPA1 y ERO1A, y downregulación de ARHGDIB y CX3CR1 en células Jurkat y THP-1, todos relacionados con proliferación y apoptosis.
En conclusión, la deficiencia de TPCN2 altera la proliferación, induce apoptosis y arresto del ciclo celular, modulando vías críticas en la respuesta inflamatoria y autoinmunidad. Estos hallazgos sugieren que TPCN2 podría actuar como factor protector en LES, ofreciendo nuevas perspectivas terapéuticas. Se requieren estudios adicionales para dilucidar los mecanismos precisos de TPCN2 en esta enfermedad.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000001893