Identificación y caracterización de células madre somáticas derivadas del tejido adiposo del acupunto Shenque (CV8) en ratones
Los acupuntos son sitios esenciales en la superficie corporal según la Medicina Tradicional China (MTC), donde el qi y la sangre se agregan para mantener las funciones corporales. Estos puntos se conectan con tejidos y órganos a través de meridianos, reflejando sus condiciones fisiológicas o patológicas. Además, se utilizan para terapias como acupuntura o masajes. A pesar de su uso milenario, los mecanismos subyacentes a sus efectos siguen siendo desconocidos. El acupunto Shenque (CV8), ubicado en el ombligo, ha sido empleado en MTC durante más de 2000 años. Sin embargo, la investigación sobre sus mecanismos moleculares ha avanzado lentamente. Este estudio exploró el papel de las células madre somáticas derivadas del tejido adiposo del CV8 en su acción terapéutica.
Observaciones anatómicas e histomorfológicas del acupunto CV8
Anatómicamente, el CV8 se localiza en el ombligo de ratones, dentro de la línea alba. Las observaciones macroscópicas revelaron una distribución de tejido adiposo en parches en esta zona. Mediante microscopía estereoscópica, estos tejidos adiposos formaban una masa globular. El análisis histomorfológico con tinción de hematoxilina y eosina (H&E) mostró que el centro del ombligo estaba compuesto por tejidos positivos para Oil Red O, ricos en adipocitos. La tinción de Masson confirmó la presencia de tejido conectivo circundante, sugiriendo que el CV8 posee una alta densidad de tejido adiposo, potencialmente relevante para sus efectos terapéuticos.
Tinción inmunohistoquímica de tejidos del CV8
Se realizó tinción inmunohistoquímica para detectar células positivas para Sca-1, un marcador de células madre somáticas. Sca-1 se distribuyó en diversas secciones del tejido del CV8, indicando la presencia de células madre somáticas en este acupunto.
Aislamiento y cultivo de células madre somáticas del CV8
Se aislaron y cultivaron tejidos adiposos del CV8 y de sitios no acupunturales en la ingle. Las células de ambos grupos mostraron adhesión a las placas de cultivo a los 3 días y alcanzaron 80% de confluencia a los 7–10 días. En la tercera generación (P3), presentaron morfología fusiforme similar a fibroblastos. El análisis por citometría de flujo reveló alta expresión de Sca-1 y CD44, y baja expresión de CD31 y CD34, confirmando su naturaleza como células madre somáticas.
Capacidad proliferativa de las células madre somáticas
Se comparó la proliferación mediante el método CCK-8. Ambos grupos mostraron una curva de crecimiento en forma de «S», con una fase lenta (primeras 72 horas), seguida de crecimiento logarítmico (días 3–5) y una meseta (días 5–7). Sin embargo, las células del CV8 exhibieron una tasa de proliferación significativamente mayor desde el día 4: día 4 (0.5138 ± 0.0111 vs. 0.4107 ± 0.0180; t = 8.447, P = 0.0011), día 5 (0.6890 ± 0.0070 vs. 0.5520 ± 0.0118; t = 17.310, P < 0.0001), día 6 (0.7320 ± 0.0090 vs. 0.6157 ± 0.0123; t = 13.190, P = 0.0002) y día 7 (0.7550 ± 0.0050 vs. 0.6313 ± 0.0051; t = 42.560, P < 0.0001).
Potencial de diferenciación de las células madre somáticas
Se evaluó la diferenciación adipogénica, osteogénica y neurogénica.
Diferenciación adipogénica
La tinción con Oil Red O mostró un área de tinción significativamente mayor en células del CV8 (9.224 ± 0.345%) frente a células no acupunturales (3.933 ± 1.800%; t = 5.000, P = 0.0075).
Diferenciación osteogénica
La tinción con Alizarina Red S reveló menor área de mineralización en células del CV8 (2.697 ± 0.627%) versus no acupunturales (7.254 ± 0.958%; t = 6.893, P = 0.0023).
Diferenciación neurogénica
Las células del CV8 formaron más neuroesferas en todos los rangos de diámetro: <50 µm (7.2000 ± 1.3040 vs. 2.6000 ± 0.5477; t = 7.273, P < 0.0001), 50–100 µm (2.6000 ± 0.5477 vs. 1.0000 ± 0.7071; t = 4.000, P = 0.0039) y >100 µm (2.6000 ± 0.5477 vs. 0.8000 ± 0.8367; t = 4.025, P = 0.0038).
Discusión
El CV8 contiene células madre somáticas con alta proliferación y capacidad diferenciativa hacia adipocitos y células neurogénicas, pero menor potencial osteogénico. Esta especificidad podría explicar su papel en la reparación de tejidos adiposos y neurales, vinculado a efectos terapéuticos como la regulación metabólica (vía adiponectina) o el tratamiento de trastornos neurológicos. La reducida diferenciación osteogénica no limita su utilidad, ya que su acción principal se asocia a otras vías.
Conclusión
Este estudio identifica células madre somáticas en el acupunto CV8 con propiedades biológicas únicas, ofreciendo nuevas perspectivas sobre los mecanismos de la terapia umbilical. Futuras investigaciones in vivo validarán su aplicabilidad en medicina regenerativa.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000001850