El ligando de muerte programada 1 (PD-L1) está sobreexpresado en neutrófilos de sangre de pacientes inmunocomprometidos VIH-negativos con neumonía por Pneumocystis jirovecii
La neumonía por Pneumocystis jirovecii (NPJ) representa un desafío clínico crítico en individuos inmunocomprometidos, particularmente en aquellos negativos para el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). A pesar de los avances en terapias antimicrobianas, las tasas de mortalidad en pacientes VIH-negativos con NPJ grave que requieren ingreso a la unidad de cuidados intensivos (UCI) superan el 50%. La inflamación neutrofílica en el líquido de lavado broncoalveolar (BAL) se ha reconocido como un marcador de mal pronóstico en estos pacientes. Los recientes hallazgos sobre la presencia del ligando de muerte programada 1 (PD-L1) en neutrófilos han impulsado investigaciones sobre su papel en la modulación de respuestas inmunitarias. Este estudio explora la expresión de PD-L1 en neutrófilos circulantes y su asociación con la disfunción de linfocitos T en pacientes VIH-negativos con NPJ, aportando nuevas perspectivas sobre la patogénesis y posibles dianas terapéuticas.
Características Clínicas y Diseño del Estudio
Se incluyó una cohorte de 17 pacientes inmunocomprometidos VIH-negativos diagnosticados con NPJ y 10 controles sin NPJ en el Hospital de la Amistad China-Japón entre septiembre de 2017 y octubre de 2018. Los diagnósticos se confirmaron mediante detección por PCR de ADN de Pneumocystis jirovecii en BAL, complementado con tinciones de Giemsa y metenamina argéntica. El grupo control consistió en pacientes inmunocomprometidos sometidos a evaluaciones diagnósticas por síntomas respiratorios, pero confirmados como negativos para NPJ. Los parámetros demográficos y clínicos clave (edad, sexo, condiciones inmunosupresoras subyacentes y coinfecciones pulmonares) fueron comparables entre grupos.
Las condiciones inmunosupresoras más frecuentes en la cohorte con NPJ incluyeron enfermedad pulmonar intersticial (52,9%), enfermedades inflamatorias sistémicas (35,3%), neoplasias hematológicas (17,6%), trasplantes de órganos sólidos (11,8%) y tumores sólidos (5,9%). Las coinfecciones pulmonares—como citomegalovirus (35,3%), bacterianas (29,4%) y fúngicas (11,8%)—fueron prevalentes pero no difirieron significativamente de los controles. Ambos grupos presentaron exposición similar a inmunosupresores, como corticosteroides (88,2% en NPJ vs. 70% en controles) y fármacos supresores de linfocitos T (70,6% vs. 30%). Destacaron los recuentos elevados de leucocitos (mediana: 11,07 × 10⁹/L vs. 6,56 × 10⁹/L) y neutrófilos (9,63 × 10⁹/L vs. 6,12 × 10⁹/L) en pacientes con NPJ. La gravedad, evaluada mediante puntuaciones APACHE II, fue mayor en el grupo NPJ (media: 21,47 ± 7,46 vs. 16,00 ± 4,76).
Aumento de la Expresión de PD-L1 en Neutrófilos Circulantes en NPJ
El análisis por citometría de flujo reveló una regulación positiva de PD-L1 en neutrófilos de pacientes con NPJ. Los neutrófilos se identificaron mediante tinción de CD11b, y la expresión de PD-L1 se cuantificó como porcentaje de células positivas. Los pacientes con NPJ mostraron una positividad mediana de PD-L1 del 8,2% (rango intercuartílico [RIC]: 5,3–12,1%) versus 3,5% (RIC: 1,8–5,2%) en controles (P = 0,0087). Un gráfico representativo de citometría demostró poblaciones definidas de neutrófilos PD-L1+ en pacientes con NPJ (Figura 1A–B).
Regulación Positiva de PD-1 en Linfocitos T CD4+ y Correlación con PD-L1 Neutrofílico
El análisis de linfocitos T mostró una elevada expresión de PD-1 en células CD4+ de pacientes con NPJ. La frecuencia mediana de células PD-1+ CD4+ fue del 24,6% (RIC: 18,4–32,1%) en NPJ versus 12,7% (RIC: 8,9–16,5%) en controles (P = 0,0053). Los niveles de PD-1 en linfocitos T CD8+ fueron similares entre grupos (19,3% vs. 16,8%; P = 0,64) (Figura 1C–D). Se observó una correlación positiva significativa entre PD-L1 en neutrófilos y PD-1 en CD4+ (coeficiente de Pearson R = 0,549; P = 0,0244), sugiriendo una interacción inmunosupresora.
Heterogeneidad Fenotípica de Subpoblaciones Neutrofílicas
Los neutrófilos se clasificaron en tres subtipos según marcadores superficiales:
- Neutrófilos maduros: CD62LbrillanteCD16brillanteCD11bbrillante
- Neutrófilos activados: CD62LtenueCD16brillanteCD11bbrillante
- Neutrófilos inmaduros: CD62LbrillanteCD16tenueCD11bbrillante
No hubo diferencias significativas en las proporciones de estos subtipos entre grupos (Figura complementaria S1B–D). Sin embargo, los neutrófilos activados exhibieron mayor expresión de PD-L1 en el grupo NPJ (mediana: 15,4% [RIC: 10,2–20,6%] vs. 8,9% [RIC: 5,1–12,3%]; P = 0,0341) (Figura complementaria S2B). Los subtipos maduros e inmaduros mostraron baja expresión de PD-L1 en ambos grupos.
Asociación con Gravedad de la Enfermedad
Los niveles de neutrófilos PD-L1+ se correlacionaron positivamente con las puntuaciones APACHE II (R = 0,5; P = 0,041). Además, la proporción de neutrófilos activados PD-L1+ se correlacionó con la frecuencia de linfocitos T CD4+ PD-1+ (R = 0,4869; P = 0,0474) (Figura complementaria S3B), reforzando la relevancia clínica de estos mecanismos.
Mecanismos e Implicaciones
Los neutrófilos son componentes de doble filo en la respuesta inmunitaria contra NPJ: su reclutamiento es crucial para la eliminación del patógeno, pero la actividad excesiva puede exacerbar el daño tisular. Estudios previos en modelos murinos mostraron que la depleción neutrofílica no reduce la lesión pulmonar, cuestionando su papel como principales efectoras de daño. Sin embargo, este estudio propone un nuevo paradigma: los neutrófilos podrían inducir inmunosupresión mediante señales PD-L1/PD-1, deteriorando la función de los linfocitos T CD4+.
El subtipo activado (CD62LtenueCD16brillante), con mayor expresión de PD-L1, probablemente migra a tejidos infectados e interactúa con linfocitos T CD4+ PD-1+, inhibiendo su función. Este mecanismo se alinea con observaciones en tuberculosis, donde neutrófilos PD-L1+ suprimen respuestas inmunitarias. La correlación entre neutrófilos PD-L1+ y puntuaciones APACHE II respalda su impacto en el pronóstico.
Limitaciones y Futuras Direcciones
El estudio tiene limitaciones, como el tamaño muestral reducido y la restricción a pacientes en UCI, lo que limita la generalización. La ausencia de análisis de PD-L1/PD-1 en BAL impide comparar células inmunitarias circulantes y pulmonares. Futuros estudios deberían explorar interacciones tisulares y evaluar bloqueadores de PD-L1/PD-1 en modelos preclínicos.
Conclusión
Este estudio identifica la sobreexpresión de PD-L1 en neutrófilos circulantes, especialmente activados, como un hallazgo clave en NPJ en pacientes inmunocomprometidos VIH-negativos. La correlación entre PD-L1 neutrofílico, PD-1 en CD4+ y la gravedad sugiere un mecanismo de evasión inmunitaria en NPJ. Estos hallazgos respaldan investigaciones futuras sobre terapias dirigidas a PD-L1/PD-1 para restaurar la inmunidad y mejorar el pronóstico en esta población de riesgo.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000000237