Efectos de la Oxigenoterapia Hiperbárica sobre la Expresión Génica Inmune en Tumores Queloides
Introducción
Los queloides representan un trastorno fibroproliferativo cutáneo complejo caracterizado por características tumorales, depósito excesivo de colágeno y recurrencia postraumática. Su patogénesis involucra interacciones multifactoriales, como predisposición genética, inflamación desregulada, disfunción inmune y vías de señalización oncogénicas. Estudios previos han identificado loci genéticos en los cromosomas 2q23 y 7p11 en casos familiares, junto con niveles elevados de citoquinas proinflamatorias (IL-1, IL-6, TNF-α) y reguladoras (IL-10, IL-4, IL-13). La participación de macrófagos y linfocitos T en la progresión del queloide, así como vías asociadas a tumores como STAT3, subrayan solapamientos con mecanismos oncológicos.
La oxigenoterapia hiperbárica (HBOT), que utiliza oxígeno al 100% bajo presión atmosférica elevada, ha demostrado reducir la recurrencia de queloides postquirúrgicos y aliviar síntomas como prurito y dolor. Estudios preclínicos sugieren que la HBOT modula respuestas inflamatorias, la transición epitelial-mesenquimal (EMT) y la expresión de citoquinas. Sin embargo, los mecanismos moleculares detrás de sus efectos sobre redes génicas inmunes y dinámicas celulares siguen poco claros. Este estudio explora las alteraciones inducidas por HBOT en la expresión génica relacionada con inmunidad y los patrones de infiltración celular en tejidos queloides.
Métodos
Pacientes y Protocolo de HBOT
Doce pacientes con queloides torácicos (22–47 años) fueron reclutados entre febrero y abril de 2021. Se dividieron en dos grupos: grupo HBOT (HK, n = 6), que recibió cuatro sesiones preoperatorias de HBOT (diarias), y grupo control (K, n = 6). La HBOT se administró en una cámara hiperbárica a 2,0 ATA durante 30 minutos, seguida de 60 minutos de inhalación de oxígeno al 100%. La escisión quirúrgica se realizó dentro de las 24 horas posteriores a la última sesión.
Análisis de Expresión Génica
Los tejidos se analizaron mediante el ensayo Oncomine Immune Response Research Assay (Thermo Fisher), que perfila 395 genes inmunes y oncológicos en 36 categorías funcionales. Los datos de secuenciación de ARN se procesaron con el software R (v3.4.3), utilizando umbrales de P < 0,05 y |log2 fold change (FC)| >1,5. Se realizaron análisis de ontología génica (GO) y rutas de KEGG para identificar procesos biológicos y vías de señalización enriquecidas.
Redes de Interacción Proteica y Genes Centrales
Las redes de interacción proteína-proteína (PPI) se construyeron con STRING (v11.5) y Cytoscape (v3.7.2). CytoHubba identificó genes centrales (hub genes), validados mediante qPCR con los cebadores de la Tabla 1.
Infiltración de Células Inmunes
El algoritmo CIBERSORT estimó las proporciones de células inmunes. La inmunohistoquímica (IHC) verificó la infiltración de linfocitos T CD4+, CD8+ y células dendríticas CD1a+ (anticuerpos de ProteinTech: CD4: 67786-1-Ig; CD8: 66868-1-Ig; CD1a: 17325-1-AP). Las células positivas se cuantificaron con ImageJ.
Análisis Estadístico
Se usaron pruebas t de Student en SPSS (v22.0), considerando significativo P < 0,05.
Resultados
Cambios Histopatológicos Post-HBOT
La tinción con hematoxilina-eosina (H&E) mostró reducción en la infiltración inflamatoria perivascular en el grupo HK vs. K (Figura 1A vs. 1B).
Expresión Génica Diferencial y Anotación Funcional
El análisis de componentes principales (PCA) diferenci