ARN circulares en células mononucleares de sangre periférica de espondilitis anquilosante

La espondilitis anquilosante (EA) es una artritis inflamatoria crónica que afecta principalmente al esqueleto axial, caracterizada por dolor lumbar inflamatorio, entesitis y anquilosis espinal progresiva. A pesar de los avances en la comprensión de su predisposición genética—especialmente la fuerte asociación con HLA-B27—los mecanismos moleculares que impulsan la patogénesis de la EA permanecen parcialmente definidos. Evidencia emergente destaca el papel de los ARN no codificantes (ARNnc) en enfermedades autoinmunes, donde los ARN circulares (ARNc) han ganado atención por sus funciones regulatorias. Este estudio investiga el perfil de expresión de ARNc en células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de pacientes con EA, identifica ARNc asociados a la enfermedad y evalúa su potencial diagnóstico y pronóstico.

Metodología y diseño experimental

Se incluyeron 60 pacientes con EA (44 hombres, 16 mujeres; edad promedio 36,9 ± 10,6 años) diagnosticados según los criterios revisados de Nueva York de 1984 y 30 controles sanos (CS; 20 hombres, 10 mujeres; edad promedio 35,8 ± 10,8 años). La EA activa (EAA) se definió como un índice de actividad BASDAI ≥6 o BASDAI >4 con reactantes de fase aguda elevados (velocidad de sedimentación globular [VSG] >22 mm/h o proteína C reactiva ultrasensible [hsCRP] >9 mg/L). La EA estable (EAE) se definió como BASDAI ≤4. Se registraron parámetros clínicos, incluidos BASDAI, BASFI y marcadores de laboratorio (hemograma, VSG, hsCRP, albúmina [ALB], globulina [GLOB]).

Microarray de ARNc y validación

El ARN total de PBMC de 6 pacientes con EA y 6 CS se analizó utilizando el Arraystar Human circRNA Array v2 (8×15K). Los ARNc diferencialmente expresados se identificaron mediante cambio fold (FC >1,5) y P <0,05. Cuatro ARNc (hsa_circRNA_001544, hsa_circRNA_102532, hsa_circRNA_008961 y hsa_circRNA_012732) se validaron mediante RT-qPCR en 60 pacientes y 30 CS. Los análisis bioinformáticos incluyeron enriquecimiento de Gene Ontology (GO), vías KEGG y predicciones de interacciones ARNc-miRNA.

Hallazgos clave

1. Perfil de expresión de ARNc en EA

El análisis de microarray identificó 1.369 ARNc diferencialmente expresados (675 upregulated, 694 downregulated) en pacientes versus CS (Figura 1A–B). La distribución cromosómica mostró diferencias significativas en los cromosomas 2, 4, 8, 17, 19, 21 y 22 (P <0,05), con la mayoría originados en exones (Figura 1D).

2. Enriquecimiento funcional de ARNc

El análisis GO reveló roles biológicos diferenciados:

• ARNc upregulated: Enriquecidos en unión a enzimas (GO:0019899), organización de orgánulos (GO:0006996) y la vía MAPK (KEGG:hsa04010).
• ARNc downregulated: Asociados a unión de ribonucleótidos de adenosina (GO:0032559) y vías como cáncer de endometrio (KEGG:hsa05213).

3. Validación de candidatos

La RT-qPCR confirmó la sobreexpresión de hsa_circRNA_001544 (U = 486,5, P <0,05) y hsa_circRNA_102532 (U = 645, P <0,05) en EA. Subgrupos mostraron:

• hsa_circRNA_001544 elevado en EAA (U = 214, P <0,05) y EAE (U = 273, P <0,05) versus CS.
• hsa_circRNA_102532 (U = 295, P <0,05) y hsa_circRNA_008961 (U = 250, P <0,05) sobreexpresados solo en EAA.
• hsa_circRNA_012732 diferenció EAA de EAE (U = 194, P <0,05).

4. Correlaciones clínicas

• hsa_circRNA_012732: Correlación negativa con BASDAI (r = −0,284), BASFI (r = −0,279), hsCRP (r = −0,334) y GLOB (r = −0,431); positiva con linfocitos (r = 0,260), VCM (r = 0,367) y ALB (r = 0,307).
• hsa_circRNA_008961: Correlación negativa con plaquetas (r = −0,334).

5. Potencial diagnóstico

La curva ROC demostró utilidad diagnóstica para:

• hsa_circRNA_001544: AUC = 0,720 (IC 95%: 0,610–0,831).
• hsa_circRNA_102532: AUC = 0,642 (IC 95%: 0,521–0,762).

6. Interacciones miRNA predichas

Se identificaron miRNAs diana como hsa-miR-3681-5p (para hsa_circRNA_001544) y hsa-miR-144-5p (para hsa_circRNA_102532), implicadas en inflamación.

Discusión

ARNc como reguladores en la patogénesis de EA

Este estudio evidencia la desregulación de ARNc en PBMC de EA, con hsa_circRNA_001544 y hsa_circRNA_102532 como biomarcadores diagnósticos potenciales. El gen parental de hsa_circRNA_001544, NR3C1 (receptor de glucocorticoides), modula respuestas inmunes y se vincula a enfermedades autoinmunes. Su sobreexpresión sugiere un mecanismo compensatorio antiinflamatorio.

hsa_circRNA_012732, derivado de MYSM1 (supresor de inmunidad innata), mostró expresión dinámica relacionada con actividad de la enfermedad. Su correlación negativa con hsCRP y BASDAI resalta su potencial para monitorear progresión.

Perspectivas mecanísticas

El enriquecimiento en vías MAPK y TNF refleja el ambiente proinflamatorio de EA. La regulación negativa en vías oncológicas sugiere mecanismos compartidos con cáncer, requiriendo investigación futura.

Implicaciones clínicas

La precisión diagnóstica de hsa_circRNA_001544 (AUC = 0,720) lo posiciona como biomarcador no invasivo complementario a HLA-B27. Por otro lado, hsa_circRNA_012732 podría guiar terapias personalizadas al reflejar actividad.

Conclusión

Este estudio proporciona el primer perfil integral de ARNc en PBMC de EA, revelando su participación en la patogénesis. hsa_circRNA_001544 y hsa_circRNA_012732 destacan como candidatos para diagnóstico y monitoreo. Futuros estudios deberán explorar sus roles funcionales y validar su aplicabilidad clínica en cohortes ampliadas.

doi.org/10.1097/CM9.0000000000001815